無菌技術消毒的條件？

一、無菌條件一般指操作的環境、機具、器材等應是無菌和潔凈度高的。無菌操作是在無菌條件下進行技術作業。在無菌操作過程中，應排除人為帶菌的因素，提供的菌種也應是純度高、無污染的。它們是同一概念的兩個方面。

（1）培養基的無菌要求

無菌措施：

①培養基要優質 配料無霉變，分散度好，加水拌制時，水分應充分滲透入料內，無外濕內燥的塊狀物。

②滅菌務須徹底 嚴格滅菌操作規程，確保滅菌的時間和溫度，杜絕滅菌“死角”。

③適當應用添加劑 實踐證明，添加適量的抑菌消毒劑，能有效地提高滅菌效果。諸如在培養基中拌入托布津、克霉王拌料劑、木材熏蒸物等，不但滅菌效果明顯，而且可縮短滅菌時間。

無菌效果檢驗：每個菌種生產者，當在采用一種新的培養基或使用新的滅菌設備等情況下，一定要通過科學的方法對滅菌效果進行檢驗。如滅菌結束后，在鍋內的不同位置，抽取若干支試管或料瓶（袋），貼上標簽，置25～30℃下培養6天后進行檢查，如果所有抽樣表面和內部均無任何變化，則表明滅菌效果良好，可供接種使用；相反，如果部分抽樣出現了雜菌污染，這就要進行科學分析，找出原因，進行改進。

（2）接種環境的無菌檢驗

接種室（箱）在每次接種前均要進行消毒滅菌，其效果受藥劑的有效期及其他因素的影響，不一定穩定，因此應定期進行消毒效果和空氣污染程度的檢驗，以便針對問題，及時改進消毒措施和操作方法。

檢驗方法：常用的方法有平板法和斜面法兩種。一般是采用常規法配制的肉湯瓊脂或馬鈴薯葡萄糖培養基倒入培養皿中，制成6個平板，打開其中3個并同時放入接種室（箱）的不同地方，暴露一定時間后重新蓋上，另3個不打開皿蓋作為對照組，然后將兩組一起置于30℃下培養，48小時后檢查有無菌落出現。

檢驗結果：平板或斜面在30℃下培養48小時后取出觀察。根據有無菌落、菌落個數和形態，來判斷空氣被污染的程度和雜菌種數。其合格標準是：平皿打開蓋5分鐘不超過3個菌落；斜面打開棉塞30分鐘不長菌落。若生長的菌落超過此數字，則要采取措施來提高滅菌效果。從菌落形態來看，如果是霉菌據多數，可先用5%碳酸對接種室（箱）進行全面噴霧，再用福爾馬林熏蒸；如果是細菌居多數，用乳酸和福爾馬林交替熏蒸，效果更好。

（3）無菌操作的要求

有了良好合格的無菌條件，而作業時不認真、不規范，也易引起染菌。因此，應做好以下幾點：

①練好基本功 操作前應事先經過嚴格的技術訓練，牢固樹立無菌概念，掌握熟練的技能、技巧。

②嚴防交叉感染 操作人員雙手易被接觸的物品、工具、棉塞、瓶袋等所停留的雜菌污染，引起操作中交叉帶菌。因此，操作前，瓶袋等必須用消毒藥物噴霧、揩拭，工具、棉塞需灼燒滅菌。

③降低灰塵量 工作人員是無菌室內更大的灰塵源，因此操作空間應保持相對靜止，杜絕增加灰塵量的動作，操作中要求細心、快速、輕巧，工作服選用灰塵量少的織物量體裁制。

④杜絕菌種帶菌 供擴制用的母種或原種要求純度高、菌齡短，使用前應嚴檢查、挑選，凡不合格或有疑慮的一概棄之不用。

二、要在寬敞明亮的空間，空氣消毒30分鐘